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光學(xué)顯微鏡的幾種檢測方法介紹

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光學(xué)顯微鏡的幾種檢測方法主要包括以下幾種:

1. 明視野觀察法(Bright-Field Microscopy)

原理:這是自顯微鏡發(fā)明以來Z傳統(tǒng)、Z普遍的應(yīng)用方法。在明視野觀察中,照明光線直接穿過被觀察的物體,形成明暗對比的圖像。

基本部件:任何物鏡和配有孔徑光闌的聚光鏡均可使用。

適用范圍:所有已染色的組織切片、血液涂片等。

注意事項(xiàng):確保庫勒照明系統(tǒng)調(diào)整良好,視場光闌不可任意開大,并避免用聚光鏡的孔徑光闌來調(diào)節(jié)視野的亮度,否則會(huì)影響分辨率。

光學(xué)顯微鏡.png

2. 暗視野觀察法(Dark-Field Microscopy)

原理:不直接觀察到照明的光線,而是觀察到被檢物體反射或衍射的光線。視場成為黑暗的背景,而被檢物體則呈現(xiàn)明亮的像。

特殊附件:需要暗視野聚光鏡,使光線斜射向被檢物體。

分辨率:遠(yuǎn)高于明視野觀察,Z高可達(dá)0.02-0.004mm。

適用范圍:觀察微生物、細(xì)菌、細(xì)胞器等微小粒子。

3. 相差觀察法(Phase-Contrast Microscopy)

原理:利用被檢物體的光程之差進(jìn)行鏡檢,有效地利用光的干涉現(xiàn)象,將人眼不可分辨的相位差變?yōu)榭煞直娴恼穹睢?/span>

基本部件:相差物鏡、明視野與相差兼用的多用途聚光鏡、對中望遠(yuǎn)鏡、綠色濾光片。

適用范圍:觀察透明、未染色或不能染色的樣品,如各種細(xì)胞、活組織等。

4. 微分干涉相襯法(Differential Interference Contrast, DIC)

原理:利用雙光束干涉的原理,使樣品細(xì)節(jié)呈現(xiàn)出浮雕效果,克服了相差法觀察時(shí)樣品細(xì)節(jié)像周圍伴隨有光暈的局限性。

特殊部件:起偏器、檢偏器、DIC插片。

適用范圍:透明或不能染色的組織切片,厚度可達(dá)100μm左右,培養(yǎng)中的活組織和活細(xì)胞等。

5. 熒光觀察法(Fluorescence Microscopy)

原理:使用熒光染料或轉(zhuǎn)染技術(shù),將熒光團(tuán)結(jié)合到目標(biāo)組織或細(xì)胞器等結(jié)構(gòu)上,再用熒光顯微鏡激發(fā)觀察,實(shí)現(xiàn)高特異性、高靈敏度觀察。

基本部件:熒光光源、激發(fā)塊(熒光臂或熒光模塊)。

適用范圍:生物學(xué)研究(如細(xì)胞和亞微觀細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞生理等)、醫(yī)療診斷(如原位熒光雜交技術(shù)檢測癌癥、呼吸道病毒檢測等)、產(chǎn)業(yè)應(yīng)用(如材料成分檢測、藥品檢測等)。

6. 偏光觀察法(Polarizing Microscopy)

原理:將普通光改變?yōu)槠膺M(jìn)行鏡檢,以鑒別某一物質(zhì)是單折射(各向同性)或雙折射性(各向異性)。

應(yīng)用:廣泛應(yīng)用于礦物、化學(xué)、生物學(xué)和植物學(xué)等領(lǐng)域,用于觀察具有雙折射性的物質(zhì)。

7. 體視顯微鏡觀察法(Stereoscopic Microscopy)

特點(diǎn):具有正象立體感,被廣泛地應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、農(nóng)林、工業(yè)及海洋生物各部門。

應(yīng)用:適用于需要立體觀察的場合,如生物樣本的解剖、觀察等。

這些檢測方法各有特點(diǎn),適用于不同的觀察需求和樣品類型。在實(shí)際應(yīng)用中,應(yīng)根據(jù)具體情況選擇合適的檢測方法。