光學(xué)顯微鏡的基礎(chǔ)原理主要涉及到放大原理、折射原理、分辨原理和照明原理等方面。以下是對這些原理的詳細(xì)介紹:
一、放大原理
光學(xué)顯微鏡利用物鏡和目鏡的組合來放大物體的細(xì)節(jié)。具體來說,物體首先經(jīng)過物鏡的放大,形成一個放大的實(shí)像。然后,這個實(shí)像再經(jīng)過目鏡的進(jìn)一步放大,Z終形成一個放大的虛像供觀察者觀看。這種兩級放大的機(jī)制使得觀察者能夠清晰地看到物體的微小細(xì)節(jié)。
二、折射原理
當(dāng)光線從一種介質(zhì)進(jìn)入另一種介質(zhì)時,會發(fā)生折射現(xiàn)象。在光學(xué)顯微鏡中,光線從空氣中進(jìn)入玻璃物鏡,再從玻璃目鏡中進(jìn)入空氣或觀察者的眼睛。通過適當(dāng)選擇物鏡和目鏡的焦距,可以使光線聚焦在樣品上,并經(jīng)過兩次折射后Z終進(jìn)入眼睛,形成放大的影像。
三、分辨原理
顯微鏡的分辨率是指能夠分辨的兩個Z近物體之間的Z小距離。分辨力受到光波長的限制,顯微鏡通常使用可見光,其波長約為400-700納米。根據(jù)鋪賽-瑞利準(zhǔn)則,分辨力取決于光學(xué)系統(tǒng)的數(shù)值孔徑和波長。數(shù)值孔徑是物鏡和聚光鏡的主要技術(shù)參數(shù),它決定了光線進(jìn)入物鏡的角度和范圍。數(shù)值孔徑越大,進(jìn)入物鏡的光通量就越大,分辨力也就越高。
四、照明原理
顯微鏡中的樣品通常需要照明才能清晰地觀察。光源(如白熾燈、LED等)發(fā)出光線,并經(jīng)過準(zhǔn)直器和濾光器的控制,通過凸透鏡產(chǎn)生平行光線,在物鏡下方照射樣品。照明光線被樣品反射、折射或透射后,通過物鏡和目鏡進(jìn)入觀察者視野。適當(dāng)?shù)恼彰鳁l件可以提高樣品的對比度和清晰度,使得觀察更加準(zhǔn)確和高效。
五、其他相關(guān)原理
數(shù)值孔徑(NA):是判斷物鏡和聚光鏡性能高低的重要標(biāo)志。NA值越大,進(jìn)入物鏡的光通量就越大,分辨力也就越高。為了充分發(fā)揮物鏡數(shù)值孔徑的作用,在觀察時聚光鏡的NA值應(yīng)等于或略大于物鏡的NA值。
放大率:顯微鏡的總放大率是物鏡放大率和目鏡放大率的乘積。然而,放大率并不是越高越好,因?yàn)檫^高的放大率可能會導(dǎo)致圖像失真和視野縮小。
焦深:是指成像面能夠清晰成像的縱深范圍。焦深與數(shù)值孔徑成反比,NA值越大焦深越小。
綜上所述,光學(xué)顯微鏡的基礎(chǔ)原理包括放大原理、折射原理、分辨原理和照明原理等。這些原理的有效結(jié)合使得光學(xué)顯微鏡成為了一種廣泛使用的觀察和研究微小物體的工具。在使用過程中,需要根據(jù)實(shí)際需求和觀察對象的特點(diǎn)來選擇合適的顯微鏡和參數(shù)設(shè)置以獲得Z佳的觀察效果。