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顯微鏡基本知識(shí)(二) - 分析行業(yè)新聞

點(diǎn)擊次數(shù):155

一、顯微鏡接物鏡頭上的標(biāo)志

  1、鏡頭種類和放大倍數(shù)

  Splan10xSplan40xSplan100x(平場(chǎng)消色差)

  2、 鏡口率(數(shù)值孔徑) N.A表示

  N.A0.25(低) N.A0.65(高) N.A1.25~1.40(油)

  3、鏡筒長(zhǎng)度(mm)

  160/—160/0.17,160/0.17(蓋片厚度)

  4、色條標(biāo)記:白100;藍(lán)40;綠20;黃10

二、顯微鏡的精度

  1、齊焦精度:鏡頭轉(zhuǎn)換應(yīng)該在一個(gè)平面上;

  2、 定位精度:鏡頭轉(zhuǎn)換應(yīng)該在一個(gè)視野中;使用不當(dāng)破壞精度

  3、合軸調(diào)節(jié):目鏡、物鏡、聚光器應(yīng)該在一個(gè)光軸上,縮小聚光器光環(huán)到*小,旋轉(zhuǎn)聚光器螺絲,調(diào)節(jié)到正中。

  3個(gè)數(shù)據(jù)使用不當(dāng)都影響觀察質(zhì)量,效果受到影響。所以觀察不清楚,拍照照片效果不佳與精度合軸不當(dāng)有關(guān)。

三、 鏡口角

  鏡口角:接物鏡鏡頭接觸,從標(biāo)本射過來的光線,伸展到接物鏡下組透鏡邊緣所張的角。

  以“α”表示。10×N.A :0.25=30°

  40×N.A:O.65=80°

  100N.A:1.25=110 °

四、鏡口率(數(shù)值孔徑)

  鏡口率是指光線從聚光器經(jīng)過蓋片,所引起折射后所形成光錐底面積的孔徑數(shù)值,又稱數(shù)值孔徑,通常以N.A 表示,刻在接物鏡和聚光器的外側(cè)。

  1.它是判斷接物鏡和聚光器的重要依據(jù),是判斷顯微鏡優(yōu)良的標(biāo)準(zhǔn)。

  2.顯微鏡質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)決定鏡口率高低,不決定放大倍率大小。

五、鏡口率的定義

  鏡口率是鏡口角半數(shù)的正弦和媒介質(zhì)曲折率兩者的乘積。公式:

  N.A== n . Sinα/2

  n :介質(zhì)折射率(空氣1;水1.33;油1.515)

  α:鏡口角

六、利用介質(zhì)提高鏡口率

  設(shè)鏡口角 90°

  空氣: 1× Sin1/2 =0.707

  水侵 : 1.33 × 0.77==0.94

  油 侵:1.515 × 0.707==1.071

  改變介質(zhì)藉以提高分辨率(兩點(diǎn)之間*大距離),決定觀察物體的精度與效果,研究者力求改變介質(zhì),提高精度。

七、增加鏡口角為110度

  設(shè)鏡口角 110°

  空氣: 1× Sin1/2=0.707

  空氣:N.A==1×0.8251 ≈0.83微米(物體大小)

  水浸:N.A== 1.333×0.8251==1.11微米

  油浸:N.A==1.515 ×0.8251==1.25微米

  要提高分辨率必須: 1.增加鏡口角;2.增大介質(zhì)折射率。

八、普通光學(xué)顯微鏡分辨率極限 

  α <180. Sinα/2<1

  干燥系物鏡鏡口率<1,在0.04~0.95之間

  油浸物鏡鏡口率提高0.83~1.25

  目前油鏡鏡口率為1.40;顯然可以提高分辨率

九、顯微鏡的分辨率

  分辨率,鑒別力,分辨本領(lǐng);

  分辨率:顯微鏡分辨被檢物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)的能力。它與“分辨距離”成反比,分辨的距離越小,顯微鏡的分辨率越高。

  分辨率(R )公式:R=λ/2 N.A=波長(zhǎng)/2鏡口率

十、光波的波長(zhǎng)

  十一、分辨率計(jì)算、分辨率計(jì)算

  低倍N.A =0.28; 高倍=0.65;油浸=1.25

  波長(zhǎng)0.55(黃色全波長(zhǎng))

  R=0.55/2×0.28=0.55/0.56=1μ(物體大小)

  R=0.55 /2×0.65=0.55/1.3=0.42μ

  R=0.55/2×1.25=0.55/2.5=0.22μ

  如果R=0.55/2×1.40= 0.55/2.8=0.19μ

  鏡口率越大,分辨率越高,物鏡的價(jià)值越優(yōu)。

十二、如何提高顯微鏡分辨率1

  1、提高鏡口率;

  波長(zhǎng)0.55;N.A1.4,則R=0.55/2×1.4=0.2微米

  普通顯微鏡的分辨率極限 0.2微米

  2.縮短波長(zhǎng)紫外線光,則R=0.27/2×1.4=0.1微米

  可提高分辨率一倍(熒光顯微鏡)

  采用更短X,γ射線,電鏡電子流波長(zhǎng)0.0387A

十三、如何提高顯微鏡分辨率2

  3、改變顯微鏡的射入方式,以直射改為斜射,暗地映光顯微鏡,提高分辨率一倍,觀察活體。

  4、改短波的結(jié)構(gòu),波峰升高;降低波谷,使用1/2波峰或波谷,從而提高分辨率,如相差顯微鏡。1952年獲、諾貝爾獎(jiǎng)。分辨率0.1微米(活體,正負(fù)相差)

  5、采用1/4波長(zhǎng)提高分辨率,如微分干涉顯微鏡

十七、暗視野顯微鏡介紹

  普通顯微鏡其照明光線從標(biāo)本下方經(jīng)過聚光器匯聚后透過標(biāo)本,進(jìn)入物鏡,它適用于觀察對(duì)光可透的標(biāo)本。若利用斜射光照射物體,使直射光線不能直接進(jìn)人物鏡,只有標(biāo)本經(jīng)斜射照明后發(fā)出的反射光可進(jìn)入物鏡,這樣在顯微鏡下可見到暗視野中明亮的物像。利用暗視野顯微鏡可以觀察到標(biāo)本的細(xì)微部分,如細(xì)菌鞭毛的運(yùn)動(dòng)和梅毒螺旋體、奮森氏螺旋體。

  聚光器的區(qū)別:暗視野顯微鏡和一般的明視野顯微鏡區(qū)別只在于二者的聚光器不同,暗視野聚光器可阻止光線直接照射標(biāo)本,使光線斜射在標(biāo)本上。常用的暗視野聚光器有拋物面聚光器、心形聚光器和同心球面聚光器。

  調(diào)焦范圍:載物臺(tái)垂直運(yùn)動(dòng)由滾柱(齒條—小齒輪)機(jī)構(gòu)導(dǎo)向,采用粗微同軸旋鈕,

  粗調(diào)行程每一圈為36.8mm,總行程為25mm,微調(diào)行程為每圈0.2mm,。有的顯微鏡具備粗調(diào)限位器和張力調(diào)整環(huán)

  結(jié)語:我是以“彎背為橋,站立為梯,橋之為道,梯之望理”告訴我整理資料。

  每人的手機(jī)或是計(jì)算機(jī),日常使用中能夠發(fā)揮*大效能,*多30%就不錯(cuò)了,能夠使用就心滿意足了,不去深入*佳。而顯微鏡就不同了,我們要發(fā)揮*大效能,探索微 ??????y????????V3910 觀世界的奧秘,要在復(fù)雜的條件下,區(qū)別細(xì)微結(jié)構(gòu),就不能不要求把儀器調(diào)整到*佳效能,取得*好效果,即使非常好的顯微鏡調(diào)節(jié)精度不夠,拍照的結(jié)果卻不盡人意,其原因是基礎(chǔ)知識(shí)與技術(shù)水平的提高。