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光學(xué)數(shù)碼顯微鏡的物鏡有多重要?

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光學(xué)數(shù)碼顯微鏡是是利用光學(xué)原理,把人眼所不能分辨的微小物體放大成像,以供人們提取微細(xì)結(jié)構(gòu)信息的光學(xué)儀器。主要包括物鏡、目鏡、反光鏡和聚光器四個(gè)部件。廣義的說(shuō)也包括照明光源、濾光器、蓋玻片和載玻片等。該顯微鏡是利用凸透鏡的放大成像原理,將人眼不能分辨的微小物體放大到人眼能分辨的尺寸,其主要是增大近處微小物體對(duì)眼睛的張角(視角大的物體在視網(wǎng)膜上成像大),用角放大率M表示它們的放大本領(lǐng)。因同一件物體對(duì)眼睛的張角與物體離眼睛的距離有關(guān),所以一般規(guī)定像離眼睛距離為25厘米(明視距離)處的放大率為儀器的放大率。顯微鏡觀察物體時(shí)通常視角甚小,因此視角之比可用其正切之比代替。

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物鏡是決定光學(xué)數(shù)碼顯微鏡性能的重要部件,安裝在物鏡轉(zhuǎn)換器上,接近被觀察的物體,故叫做物鏡或接物鏡。物鏡的放大倍數(shù)與其長(zhǎng)度成正比。物鏡放大倍數(shù)越大,物鏡越長(zhǎng)。物鏡主要參數(shù)包括:放大倍數(shù)、數(shù)值孔徑和工作距離。

①放大倍數(shù)是指眼睛看到像的大小與對(duì)應(yīng)標(biāo)本大小的比值。它指的是長(zhǎng)度的比值而不是面積的比值。例:放大倍數(shù)為100×,指的是長(zhǎng)度是1μm的標(biāo)本,放大后像的長(zhǎng)度是100μm,要是以面積計(jì)算,則放大了10,000倍。

②數(shù)值孔徑也叫鏡口率,簡(jiǎn)寫(xiě)NA 或A,是物鏡和聚光器的主要參數(shù),與顯微鏡的分辨力成正比。干燥物鏡的數(shù)值孔徑為0.05-0.95,油浸物鏡(香柏油)的數(shù)值孔徑為1.25。

③工作距離是指當(dāng)所觀察的標(biāo)本清楚時(shí)物鏡的前端透鏡下面到標(biāo)本的蓋玻片上面的距離。光學(xué)數(shù)碼顯微鏡物鏡的工作距離與物鏡的焦距有關(guān),物鏡的焦距越長(zhǎng),放大倍數(shù)越低,其工作距離越長(zhǎng)。例:10倍物鏡上標(biāo)有10/0.25和160/0.17,其中10為物鏡的放大倍數(shù);0.25為數(shù)值孔徑;160為鏡筒長(zhǎng)度(單位mm);0.17為蓋玻片的標(biāo)準(zhǔn)厚度(單位 mm)。10倍物鏡有效工作距離為6.5mm,40倍物鏡有效工作距離為0.48mm 。