熒光顯微鏡是以紫外線為光源,用以照射被檢物體,使之發(fā)出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。
1、打開燈源,超高壓汞燈要預(yù)熱15min才能達(dá)到亮點(diǎn)。
2、透射式熒光顯微鏡需在光源與暗視野聚光器之間裝上所要求的激發(fā)濾片,在物鏡的后面裝上相應(yīng)的壓制濾片。落射式熒光顯微鏡需在光路的插槽中插入所要求的激發(fā)濾片、雙色束分離器、壓制濾片的插塊。
3、用低倍鏡觀察,根據(jù)不同型號熒光顯微鏡的調(diào)節(jié)裝置,調(diào)整光源中心,使其位于整個(gè)照明光斑的中央。
4、放置標(biāo)本片,調(diào)焦后即可觀察。使用中應(yīng)注意:未裝濾光片不要用眼直接觀察,以免引起眼的損傷;用油鏡觀察標(biāo)本時(shí),要用無熒光的特殊鏡油;高壓汞燈關(guān)閉后不能立即重新打開,需待汞燈完全冷卻后才能再啟動,否則會不穩(wěn)定,影響汞燈壽命。
5、觀察。例如:在熒光顯微鏡下用藍(lán)紫光濾光片,觀察到經(jīng)0.01%吖啶橙熒光染料染色的細(xì)胞,細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)被激發(fā)產(chǎn)生兩種不同顏色的熒光(暗綠色和橙紅色)。