光學顯微鏡的照明方式多種多樣,以適應不同樣品特性和觀察需求。以下是幾種常見的照明方式:
直接照明:
光線直接射向物體,用于獲取清晰的影像,尤其在需要高對比度的圖像時使用。
散射照明:
提供無方向、不刺眼的柔和光線,適合高反射的物體,能夠減少反光和眩光,提高觀察舒適度。
背面照明:
光線從物體背面射來,形成均勻的視場光,常用于測量物體的尺寸和確定物體的方向,對于透明或半透明樣品尤為有效。
同軸照明:
通過特定設計,使光源以垂直向下的方式照射物體表面,形成均勻的照明效果。這種照明方式對檢測高反射的平面物體很有幫助,能夠減少反射光對觀察的影響。
透射光照明:
適用于透明或半透明的被檢物體,特別在生物學顯微鏡中廣泛應用。透射光照明可以分為中心照明和斜射照明兩種。中心照明中,光束的中軸與顯微鏡的光軸同在一條直線上,又進一步細分為臨界照明和柯勒照明(庫勒照明)。柯勒照明通過特殊的光學設計,使光源發(fā)出的光先經(jīng)過毛玻璃等散射元件,再經(jīng)過透鏡將光線均勻地照射在樣品上,即使光源本身亮度不均勻,也能在標本上形成均勻的照明,同時減少雜散光的影響。
暗視場照明:
光線以一定傾斜角度投射到物體表面,使傾斜的散光進入相機,從而在暗的背景下創(chuàng)造明亮的點或線條。這種照明方式適用于觀察表面細節(jié)和結(jié)構(gòu),特別是當樣品本身對比度較低時,能夠有效提高圖像的對比度。
斜照明:
也稱斜射照明,光線從側(cè)面斜射到樣品上,能夠產(chǎn)生一定的立體感,使樣品中一些原本不易觀察到的結(jié)構(gòu)凸顯出來。斜照明方式常用于細胞培養(yǎng)室中的倒置顯微鏡中。
萊茵伯格照明(暗場照明的特殊形式):
實際上是暗場照明的一種變體,通過在光源通過聚光器的路上插入彩色的透明濾光片,可以用顏色來區(qū)分樣品中不同空間的成分,增強觀察的多樣性和準確性。
每種照明方式都有其獨特的應用場景和優(yōu)勢,選擇合適的照明方式對于提高觀察效果至關(guān)重要。在實際應用中,可以根據(jù)樣品的性質(zhì)、觀察目的以及顯微鏡的性能特點來靈活選擇和使用不同的照明方式。