顯微鏡像的質(zhì)量主要取決于像的反差和像的亮度，而一定要防止在顯微鏡像中把激發(fā)光和發(fā)射的熒光混在一起。

熒光顯微鏡檢術(shù)中，顯微鏡像的質(zhì)量主要取決于像的反差和像的亮度，像反差是由樣品中特異染色的結(jié)構(gòu)發(fā)射的熒光與本底上觀察到的光之比決定的，本底光包括透過(guò)阻擋激發(fā)光的D二濾波器的雜散激發(fā)光、組織成分的自生熒光和顯微鏡光學(xué)部分的光，熒光顯微鏡檢術(shù)國(guó)盡全力要的是一方面獲得更好的像反差，同時(shí)又維持像有足夠亮度，顯然，獲得更好的反差像的辦法可能導(dǎo)致熒光像的變暗，例如，由于使用又維持像有足夠 亮度，為了便于直觀觀察和顯微照相時(shí)用適當(dāng)短的曝光時(shí)間，需要足夠亮的像，所以常要用寬波激發(fā)，于是僅產(chǎn)生特異FRP的熒光，而且還有其它組織成分的熒光，即構(gòu)成非特異本底熒光，大多數(shù)應(yīng)用中，一定要兼顧特異強(qiáng)度與非特異本底熒光在合理的低水平之間的要求。